BIOPHYSIQUE

Investigation des structures moléculaires

La biophysique moléculaire se donne pour tâche l'étude de l'organisation spatiale des macromolécules en relation avec leurs interactions fonctionnelles dans le milieu biologique. C'est peut-être dans ce domaine que la puissance des méthodes physiques se révèle de façon le plus spectaculaire, par leur pouvoir de résolution aussi bien spatiale que temporelle ; certaines de ces méthodes mesurent des distances de l'ordre du cent millionième de centimètres avec une précision dépassant le dixième, précision nécessaire car c'est à cette distance que se situent les interactions importantes. D'autres mesurent des mouvements relatifs de molécules et les phénomènes qui leur sont associés à l'échelle du milliardième de seconde.

Ces recherches structurales ont pris un grand essor à partir du moment où il a été devenu possible d'isoler, de purifier et de cristalliser les protéines et les acides nucléiques ; les méthodes cristallographiques ont pu leur être appliquées et un pas décisif fait dans la connaissance de ces constituants biologiques fondamentaux.

La détermination de la structure tridimensionnelle de l'hémoglobine par Perutz et celle de l'acide désoxyribonucléique (ADN) par Crick et Watson dans les années cinquante ont été les premiers exemples de ce type de recherche, avec un retentissement considérable : dans le cas de l'hémoglobine, l'organisation dans l'espace de ces pelotons de longues chaînes d'acides aminés, jusqu'alors absolument inextricables, a été pour la première fois connue et visualisée, ainsi que la disposition des plans tétrapyroliques des hèmes porteurs de la fonction ; cette connaissance a été en elle-même inestimable pour la compréhension des mécanismes par lesquels cette protéine joue son rôle de vecteur dans les échanges d'oxygène et de gaz carbonique liés à la respiration. Mais, par-delà, a été ouverte la possibilité de mettre en correspondance la réactivité chimique des protéines catalytiques avec leur structure.

Dans un domaine non moins important, la découverte de la structure en double hélice de l'ADN a apporté une information clé pour le développement de la biologie moléculaire de l'information génétique. Bien d'autres macromolécules ont été depuis purifiées, cristallisées et étudiées avec une précision croissante par les méthodes cristallographiques mettant en œuvre soit la diffraction X, soit la diffraction de neutrons. Les informations obtenues par cette voie sont irremplaçables et font partie de toute étude de structure fonctionnelle approfondie.

Si puissante soit-elle, la cristallographie ne donne qu'une image statique de la structure d'une macromolécule, figée dans un état solide particulier, et ne peut fournir d'information directe sur l'état fonctionnel de celle-ci. C'est l'étude en solution dans des milieux aussi proches que possible des conditions physiologiques qui peut seule apporter des renseignements sur leur comportement dynamique fonctionnel. Pour ce faire, il est possible de s'adresser à une grande variété de propriétés des macromolécules en solution.

Des propriétés globales en premier lieu : l'étude de la vitesse de migration en champ de gravité intense (ultracentrifugation) permet ainsi de connaître, en se fondant sur les lois de l'hydrodynamique, la taille de la macromolécule dans les milieux aqueux, ainsi que sa forme : sphère, ellipse, bâtonnet. Ces études menées en fonction de paramètres physico-chimiques, température, concentration saline, pH et en fonction également des interactions qu'elle peut avoir avec des molécules particulières, substrat de réaction enzymatique, facteur de régulation, permet de connaître les changements de conformation éventuels associés aux différents états fonctionnels. Pour ce type de recherche on utilise également les propriétés optiques, comme la diffusion quasi élastique de la lumière laser. À ces approches globales, d'autres viennent s'adjoindre, permettant de pénétrer plus avant dans l'intimité des macromolécules ; telle est par exemple l'étude des vitesses d'échange isotopique d'hydrogène contre le Tritium radioactif qui fournit des renseignements précieux sur l'accessibilité plus ou moins grande du milieu solvant à telle ou telle partie de la macromolécule, son degré donc d'ouverture sur l'extérieur [...]

1  2  3  4  5 …
pour nos abonnés,
l’article se compose de 10 pages