IMMUNOCHIMIEImmunocytologie

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Les diverses techniques immunocytologiques

L'immunofluorescence

En immunofluorescence, les antigènes sont détectés en utilisant des anticorps marqués avec des fluorochromes. Lorsque les fluorochromes sont illuminés par un rayonnement de courte longueur d'onde, ils émettent un rayonnement lumineux de longueur d'onde plus grande et visible avec un microscope approprié. La fluorescéine et la rhodamine sont les deux fluorochromes les plus utilisés. La fluorescéine émet dans le jaune-vert et la rhodamine dans le rouge des longueurs d'onde du spectre visible. Les structures cellulaires ayant fixé ces anticorps fluorescents sont ainsi détectables et ont l'aspect de taches brillantes, colorées en vert ou rouge, le fond de la préparation étant noir. L'utilisation de la fluorescéine et de la rhodamine permet d'avoir une double coloration sur une même préparation cellulaire, mais aussi sur une même cellule.

L'immunofluorescence (fig. 1) est une technique très sensible. Une très petite quantité d'antigène est suffisante pour donner une réaction positive. Ainsi, 0,8 × 10-4g/mm2 = de polysaccharides capsulaires du pneumocoque peuvent être détectés grâce à cette technique. De toutes les méthodes immunocytologiques, l'immunofluorescence est certainement la plus couramment utilisée ; elle a grandement contribué à nos connaissances actuelles dans divers domaines de la biologie. Si on la compare aux autres méthodes immunocytologiques, l'immunofluorescence est certainement la plus simple et la plus rapide. Sa seule limitation réside dans le fait qu'elle ne peut pas être utilisée dans des études ultrastructurales.

L'immunoferritine

La technique de l'immunoferritine est appliquée pour la localisation des antigènes à l'aide du microscope électronique. La ferritine est une molécule protéique de haut poids moléculaire (700 000) qui contient 23 p. 100 de fer concentré au centre de la molécule. Ceci rend la ferritine dense aux électrons et permet la visualisation des anticorps marqués en microscopie électronique. Cette technique a été utilisée avec succès pour la localisation des ultrastructures [...]


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Écrit par :

  • : docteur ès sciences, professeur à l'Institut Pasteur, directeur de recherche au C.N.R.S.

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Pour citer l’article

Stratis AVRAMEAS, « IMMUNOCHIMIE - Immunocytologie », Encyclopædia Universalis [en ligne], consulté le 16 octobre 2019. URL : http://www.universalis.fr/encyclopedie/immunochimie-immunocytologie/