IMMUNOCHIMIEImmunocytologie

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Principe de la méthode immunocytologique

Les techniques immunocytologiques se fondent sur l'utilisation d'un anticorps couplé avec un marqueur, visible par l'intermédiaire du microscope optique ou électronique. Pour localiser un constituant, la préparation cellulaire est incubée avec un anticorps marqué, spécifique de ce constituant. Après réaction de cet anticorps marqué sur le constituant cellulaire correspondant, l'excès de réactif est éliminé par lavages, et le marqueur, associé par l'intermédiaire de l'anticorps au constituant cellulaire, est mis en évidence en microscopie optique ou électronique à l'aide d'un procédé approprié. À partir de ce procédé, décrit pour la première fois par Coons en 1942 et appelé « méthode directe », plusieurs variantes ont été développées. L'une des plus utilisées est la méthode indirecte dans laquelle les sections tissulaires sont incubées avec un antisérum préparé dans l'espèce A, spécifique de l'antigène tissulaire que l'on étudie ; le tissu est alors lavé et incubé avec un anticorps marqué, préparé dans l'espèce B et dirigé contre les immunoglobulines de l'espèce A. Les marqueurs les plus souvent utilisés sont les fluorochromes, les radioéléments, la ferritine, l'or colloïdal et les enzymes ; dans certains cas, des métaux lourds, des billes de plastique de taille définie, des virus et l'hémocyanine ont pu être utilisés pour marquer les anticorps.

Les anticorps marqués avec la fluorescéine sont utilisés pour détecter des constituants cellulaires au niveau du microscope optique alors que la ferritine est utilisée en microscopie électronique. Les anticorps marqués avec des radioéléments, de l'or colloïdal ou des enzymes peuvent être utilisés aussi bien en microscopie optique qu'électronique. Il existe certains traits communs à toutes les méthodes immunocytologiques et d'autres qui sont particuliers à chacune d'entre elles. Avant de décrire ces techniques, nous résumerons leur [...]


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Écrit par :

  • : docteur ès sciences, professeur à l'Institut Pasteur, directeur de recherche au C.N.R.S.

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Pour citer l’article

Stratis AVRAMEAS, « IMMUNOCHIMIE - Immunocytologie », Encyclopædia Universalis [en ligne], consulté le 14 novembre 2019. URL : http://www.universalis.fr/encyclopedie/immunochimie-immunocytologie/