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CHROMATOGRAPHIE

Appareillage

La phase stationnaire (solide poreux greffé ou non) peut être soit maintenue en couche mince grâce à un liant (d'épaisseur de 100 à 200 μm) sur un support solide (plaque ou baguette) en verre, métal ou polymère organique (cf. Chromatographie planaire), soit placée sans liant à l'intérieur d'une colonne obturée à ses deux extrémités mais perméable à la phase mobile. À part les colonnes en verre, ouvertes (type Tswett : fig. 1) utilisées uniquement à des fins préparatives dans certains laboratoires, deux types de colonnes existent en chromatographie moderne : les colonnes à garnissage pour lesquelles la phase fixe est soit un solide inerte (C.L. d'exclusion), soit un adsorbant pur (C.G.S., C.L.S., C.FSbC.S., C.FSC.S.), soit un liquide (à la température de travail ; C.G.L.), déposé sur un support granulaire poreux dont il représente de 5 à 20 p. 100 en poids, et les colonnes à tube ouvert (colonnes capillaires) pour lesquelles la phase fixe est un film d'épaisseur régulière (allant de 0,1 μm à 5 μm) recouvrant la paroi interne.

Plus récemment, les garnissages (particules poreuses ou monolithes poreux) aussi bien que les parois des tubes capillaires (de silice), qui auparavant étaient enduits, ont été traités chimiquement pour ancrer la phase stationnaire sur le support (C.G.L., C.L.L., C.FSbC.L., C.FSC.L, C.L. échangeuse d'ions, C.L. d'affinité). L'avantage de ces derniers supports est que la phase stationnaire n'est en général plus entraînable par la phase mobile. Cette phase stationnaire greffée est alors assimilée à un liquide, bien qu'elle n'en soit pas réellement un (c'est en fait une couche monomoléculaire ou polymoléculaire fluide, plus ou moins orientée par rapport à la surface solide sur laquelle elle est greffée, ce qui n'est donc pas un liquide à proprement parler, mais n'est pas non plus un solide).

Hydrocarbures aromatiques - crédits : Encyclopædia Universalis France

Hydrocarbures aromatiques

Encyclopædia Universalis France

Tout appareil de chromatographie est conçu suivant le même principe (fig. 4). On trouve dans l'ordre :

– Une source de phase mobile (soit un tube de gaz comprimé, soit un ou plusieurs flacons contenant les constituants liquides de la phase mobile reliés à une ou plusieurs pompes à haute pression).

– Un régulateur de débit permettant de délivrer un débit constant dans la colonne [L'écoulement est laminaire. Cependant des développements récents remettent la chromatographie à flux turbulent au goût du jour (cf. mécanique des fluides - Écoulement des fluides visqueux)]. Dans quelques applications, le débit est programmé dans le temps.

– Un injecteur thermostaté ou non : partie de l'appareil où tout l'échantillon à analyser doit être transféré instantanément, à partir d'une seringue, dans la phase mobile sans en arrêter le flux.

– La colonne chromatographique proprement dite placée à l'intérieur d'une enceinte thermorégulée.

– Le détecteur (thermorégulé en chromatographie gazeuse).

– Un intégrateur (ou une station de données) relié au détecteur et délivrant le chromatogramme.

– Un régulateur de pression dans le seul cas de l'utilisation de fluide subcritique et supercritique.

– Un débitmètre, le cas échéant, pour contrôler le débit délivré.

Dans pratiquement toutes les chromatographies, l'écoulement de la phase mobile est gouverné par la différence de pression existant entre la tête et la sortie de colonne. En chromatographie gazeuse, la perte de charge maximale à laquelle les expériences sont couramment menées est de l'ordre de 0,5 MPa (mégapascal ; 5 atmosphères) alors qu'en chromatographie liquide, cette perte de charge maximale est de l'ordre de 40 MPa (400 atmosphères). Cela lui a donné originellement son nom moderne : la chromatographie liquide à haute pression (caractérisée par le sigle anglais : H.P.L.C.). Compte tenu du considérable[...]

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Écrit par

  • : docteur ès sciences, professeur à l'École supérieure de physique et de chimie industrielles, Paris, ingénieur, École supérieure de physique et de chimie industrielles
  • : professeur de chimie organique à l'université d'Aix-Marseille-II
  • : professeur des Universités, université de Paris-XI, I.U.T. d.Orsay

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. In Encyclopædia Universalis []. Disponible sur : (consulté le )

Médias

Partage en phase liquide - crédits : Encyclopædia Universalis France

Partage en phase liquide

Encyclopædia Universalis France

Chromatographie sur papier - crédits : Encyclopædia Universalis France

Chromatographie sur papier

Encyclopædia Universalis France

Phase aqueuse - crédits : Encyclopædia Universalis France

Phase aqueuse

Encyclopædia Universalis France

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Autres références

  • ALCALOÏDES

    • Écrit par Jacques E. POISSON
    • 5 686 mots
    • 5 médias
    ...successives en milieu acide à l'aide de solutions de pH décroissant, en pratiquant une séparation par contre-courant d'un solvant non miscible, et surtout par chromatographie. Les méthodes chromatographiques consistent à séparer les divers constituants d'un mélange en fonction de leur affinité pour un adsorbant...

  • ANALYTIQUE CHIMIE

    • Écrit par Alain BERTHOD, Jérôme RANDON
    • 8 885 mots
    • 4 médias
    La chromatographie est une méthode de séparation des constituants d'un échantillon basée sur les différences d'affinités de ceux-ci pour chaque phase d'un système biphasique. La séparation s'effectue dans une colonne chromatographique à l'intérieur de laquelle est fixée une phase dite stationnaire....

  • BIOCHIMIE

    • Écrit par Pierre KAMOUN
    • 3 880 mots
    • 5 médias
    ...cellulaires. Parmi ces méthodes, il faut indiquer l'électrophorèse, qui permet la séparation, dans un champ électrique, de molécules chargées, et la chromatographie. Cette dernière méthode, inventée en 1906 par le botaniste russe Mikhaïl Tswett, resta dans l'oubli jusqu'en 1931. Elle permet de séparer...

  • CASSINI-HUYGENS (MISSION)

    • Écrit par Athéna COUSTENIS
    • 4 179 mots
    • 8 médias
    – un chromatographe et spectromètre de masse pour déterminer la composition atmosphérique (GCMS, Gas Chromatograph and Mass Spectrometer) ;
  • Afficher les 15 références

Voir aussi

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