Les cellules sont composées de myriades de constituants chimiques qui ne peuvent être révélés, même avec les plus puissants microscopes optiques ou électroniques. Au cours de ces vingt dernières années, l'analyse de ces constituants cellulaires a débuté grâce à l'emploi d'anticorps qui peuvent révéler, d'une façon extrêmement spécifique, de très faibles quantités de molécules. Du fait que l'on sait maintenant produire des anticorps contre pratiquement n'importe quel constituant cellulaire, on peut les localiser en microscopie optique ou électronique par le biais des méthodes immunocytologiques. Ces techniques combinent l'emploi de procédés cytologiques avec des réactions immunologiques. Grâce à l'extrême spécificité de la réaction antigène-anticorps les techniques immunocytologiques peuvent être pratiquement appliquées à la totalité des domaines de la biologie. Aussi, plutôt que de choisir un domaine particulier de la biologie, il nous a semblé préférable de décrire ici les bases des techniques immunocytologiques.
1. Principe de la méthode immunocytologique
Les techniques immunocytologiques se fondent sur l'utilisation d'un anticorps couplé avec un marqueur, visible par l'intermédiaire du microscope optique ou électronique. Pour localiser un constituant, la préparation cellulaire est incubée avec un anticorps marqué, spécifique de ce constituant. Après réaction de cet anticorps marqué sur le constituant cellulaire correspondant, l'excès de réactif est éliminé par lavages, et le marqueur, associé par l'intermédiaire de l'anticorps au constituant cellulaire, est mis en évidence en microscopie optique ou électronique à l'aide d'un procédé approprié. À partir de ce procédé, décrit pour la première fois par Coons en 1942 et appelé « méthode directe », plusieurs variantes ont été développées. L'une des plus utilisées est la méthode indirecte dans laquelle les sections tissulaires sont incubées avec un antisérum préparé dans l'espèce A, spécifique de l'antigène tissulaire que l […]
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