4. La construction et le transfert de gènes
Un gène ne peut être complètement étudié et exploité qu'après avoir été transféré dans une cellule ou un organisme, où il s'exprime.
Il est possible d'isoler n'importe quel fragment de l'ADN d'un génome et d'en disposer en quantité suffisante pour en modifier la structure et le réintroduire dans une cellule ou un organisme entier. Pour ce faire, les fragments d'ADN sont insérés dans des minichromosomes bactériens que l'on appelle des plasmides. Ces derniers peuvent être introduits dans des bactéries où ils se répliquent en grand nombre tout en restant indépendant du chromosome de la bactérie (cf. génie génétique). Cette opération, qui conduit à l'isolement de chaque fragment d'ADN et à son amplification, est appelée clonage de gène parce qu'elle implique le clonage des bactéries qui permet de disposer et, donc, d'étudier n'importe quel fragment d'ADN.
Notons, par ailleurs, que les biologistes disposent d'appareils permettant de procéder à la synthèse chimique complète de gènes fonctionnels. L'ADN peut être coupé très précisément en morceaux par des protéines appelées enzymes de restriction. Ces fragments d'ADN peuvent être associés par d'autres enzymes, les ligases. Ces outils permettent donc de construire des gènes à partir d'éléments d'origine variée.
L'assemblage des fragments d'ADN permet de greffer la région régulatrice d'un gène (située essentiellement en amont du message génétique proprement dit) à un gène rapporteur dont le produit est une protéine aisément mesurable. L'expression d'une telle construction dans une cellule ou un organisme entier permet de définir, de proche en proche, la structure et le fonctionnement des régions régulatrices des gènes.
Le transfert d'un gène entier, natif ou muté, permet d'étudier la fonction de ce gène en évaluant les effets nouveaux qui sont induits par sa présence et son expression. Il permet, dans certains cas, de mimer finement des maladies humaines, que l'on peut alors étudier plus aisément.
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